[A14] Western Blot Part.3 (Ab probing & Detection) 이론편
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- Опубликовано: 9 сен 2024
- 바이오 연구실에서 가장 많이 활용되는 단백질 분석 실험법
Western Blot assay !
Western blot 3편이 업로드 되었습니다!
기다려주신 분들 너무너무 죄송합니다. :(
제가 학술상담이라는 본업이 있다보니 영상 편집이 더뎌지네요...
부디 넓은 아량으로 이해 부탁드립니다.❤
이번 편에서는 Antibody probing 그리고 Detection 단계에 대해 알아보겠습니다. :)
***영상 중간 Antibody 고르는 법, 사용해야하는 control 등에 대한 정보도 있으니 꼭 꼼꼼히 확인해주세요!
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![[A13] Western Blot Part.2 (SDS-PAGE & Transfer) 이론편](http://i.ytimg.com/vi/uDP9174Yq0A/mqdefault.jpg)
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00:29 Ponceau S Staining
01:10 Antibody Probing의 정의
01:26 Antibody(Immunoglobulin)
02:35 Antibody Probing Step 1.Blocking
03:28 Antibody Probing Step 2. Atnibody Probing
06:01 Detection
07:26 Western Blot data 분석
08:04 Western Blot Control
*Antibody 선택 가이드 확인하기! : www.seoulin.co.kr/intro/antibody-%ec%84%a0%ed%83%9d-%ea%b0%80%ec%9d%b4%eb%93%9c/
*바이오세상 Blocking&Detection 관련 Reagent 정보 : www.seoulin.co.kr/intro/western-blot-%ea%b4%80%eb%a0%a8-%eb%b0%94%ec%9d%b4%ec%98%a4%ec%84%b8%ec%83%81-%ec%8b%9c%ec%95%bd/
*Cytiva Amersham™ Antibody 정보 : www.seoulin.co.kr/intro/cytiva-amersham-western-blotting-workflow-probing-%ea%b4%80%eb%a0%a8-%ec%a0%9c%ed%92%88-%ec%86%8c%ea%b0%9c/
*Cytiva Amersham™ ECL 시약 정보 : www.seoulin.co.kr/intro/cytiva-amersham-western-blotting-workflow-detection-%ea%b4%80%eb%a0%a8-%ec%a0%9c%ed%92%88-%ec%86%8c%ea%b0%9c/
*Western Blot Trouble-Shooting Guide : www.seoulin.co.kr/intro/western-blot-troubleshooting/
>>>>>서린바이오 공식 인스타그램
너무 도움이 되네요 ㅠㅠㅠ 감사합니다 ☺️
실험실에서 어려움이 많았는데 서린바이오사이언스 채널에서 만들어 주신 영상들로 너무 도움 많이 되고 있어요!
나의 교수님… 써바싸 티비 너무 감사합니다.
참 알기 쉽게 설명해주셔서 감사합니다^^
너무너무 유익해요....
너무 잘 보고있습니다!
감사합니다
친절한 설명 굉장히 감사합니다! 추가적인 정보를 얻을 수 있는 레퍼런스 혹시 추천해주실 수 있을까요?
안녕하세요 영상 감사히 잘 봤습니다.
WB를 한 번도 해보지 않은 입장에서 궁금한 점이 생겨 질문드립니다.
antibody를 선정할 때 sample species고려해야한다고 말씀해주셨습니다.
이 항체를 구매해서 사용하는 것으로 이해를 했는데, 그렇다면 파는 곳에서는 얼마나 자세하게 이것을 분류하고있나요?
예를들어 E.coli GFP를 발현했다하면 E.coli 안티젠만 사용하면 되는 것인가요? 아니면 E.coli라는 species 중에서도 더 하위 카테고리가 있어서 본인의 실험과 맞는 항체를 찾아야하는건가요?(만약 후자라면 어느정도까지 하위가 나눠져있는지도 좀 궁금합니다)
두번째 질문으로, 만약 예를들어 E.coli의 GFP와 결합하는 안티젠을 판매중이어서 사용한다 쳤을 때, 그 결합부가 있을텐데, 그 부분을 새롭게 design하여 발현시킨 단백질이라면 상용화된 E.coli GFP는 사용하지 못하는 것인가요?
WB를 하지 않는 랩에서 연구중이라 정말 뜬구름 잡는 질문일 수도 있지만 강의 듣다 궁금한 점이 생겨서 댓글 남깁니다. 감사합니다.
영상 정말 유익했습니다. Housekeeping genes에서 GAPDH와 beta-actin의 차이점과 실험결과에서 band가 다르게 나온 이유는 무엇때문인가요?
GAPDH와 Beta-actin은 그냥 다른 protein입니다. 다만, 두 protein 모두 일반적으로 mammalian cell에서 다량 발현되는 protein이기 때문에 control로 사용하는 protein이라 생각해주시면 됩니다. 또한 두 protein이 말 그대로 "다른" protein이기 때문에 다른 size의 band가 나타나는 것은 당연합니다. :)