정말 쏙들어오는 설명 감사합니다. 설명듣다보니 마지막의 Ct값은 어찌 구하는지 궁금합니다. 알고있는 표준 DNA양도 같이 측정 후, 표준 DNA의 왼쪽 그래프는 DNA양이 많고 뒤쪽 그래프는 상대적으로 적은건가요? 아니면 기계가 형광세기로 알아서 세어주나요? 그리고 threshold 설정의 기준이 있을까요?
Ct값은 형광이 증폭되는 시점을 토대로 그려지는 Threshold 값을 바탕으로 구해지며, Threshold는 유의미한 결과를 관찰할 수 있는 부분에 설정되게 됩니다. 대부분의 Real-time PCR 장비의 경우 baseline 표준편차값 대비 약 10배 정도의 형광이 관찰되는 부분을 thereshold가 되도록 설정되어 있습니다.
![[A08] 유세포 분석(Flow Cytometry)로 어떤 연구를 할 수 있나요!?](http://i.ytimg.com/vi/q_E0qsmvCz0/mqdefault.jpg)
![[A08] 유세포 분석(Flow Cytometry)로 어떤 연구를 할 수 있나요!?](/img/tr.png)
![[A01] PCR (Polymerase Chain Reaction) 이론 및 원리](http://i.ytimg.com/vi/8VBCFUW0PCs/mqdefault.jpg)
제가 처음에 quantitation PCR이라고 말했지만, 정량 PCR은 quantitative PCR이라고 하셔야해요! 혼돈을 드려 죄송합니다!! (꾸벅)
00:11 qPCR(quantitative PCR) 정의
01:13 qPCR 사용 이유
01:52 PCR 증폭과정 3단계(Exponential phase/Linear phase/plateau phase)
02:56 DNA증폭을 Real time으로 확인하는 방법
03:14 형광Dye 방식_Detection chemistry
04:12 Probe 방식_Detection Chemistry
06:01 Probe(TaqMan) vs Dye(SYBR green)
06:32 qPCR 그래프
Cytiva PCR관련 제품군 바로가기 > www.cytivalifesciences.com/en/us/shop/molecular-biology/pcr-and-amplification
Real-time PCR 원리가 궁금했는데 덕분에 제대로 이해하고 갑니다! 너무너무 쉽고 이해되게 잘 설명해주시네요~^^
앞으로도 이런 좋은 영상들 많이많이 부탁드립니다! 감사합니다(꾸벅)
시험기간에 한 줄기 빛이 되어주셔서 감사합니다ㅜㅜ
간호학과대학원생입니다~ 쉽지만 전문적인 설명이 큰 도움이 되었어요~~ 너무 감사합니다~
정확하고 자세한 설명 감사합니다 많은 도움이 되었습니다!
도움이 되셨다니 다행입니다😀
우와♡ qPCR 대해 올려주셔서 감사합니다😊
정리가 잘되었습니다💖 써바싸TV 최고👍💕
더 빨리 올려드렸어야하는데, 조금 늦었네요 ㅜ.ㅜ 그래도 만족해주셔서 다행입니다! 감사합니다. :)
진짜 최고.....학부연구생 도움받고가여 사랑합니다
이하루님! 랩실 생활 써바싸TV가 응원합니다😊
항상 잘 보고 있습니다. 좋은 영상 감사드립니다.
문과인데 6모때문에 pcr지문 공부해야했는데 이해가 잘 되네요 ㅠㅠ
학부생 연구 중인데 도움이 많이 되었어요 감사합니다. 다른 학부생들에게 소문 낼게요!
도움이 되셨다니 다행입니다! 너무너무 감사해요♡
덕분에 큰 도움이 됐습니다!! 써바싸TV 화이팅입니다! 좋은 영상 감사합니다 :)
도움이 되셨다니 정말 기뻐요! 응원 댓글 감사합니다!! :D
감사합니다!!😂❤
제가 처음에 quantitation PCR이라고 말했지만, 정량 PCR은 quantitative PCR이라고 하셔야해요! 혼돈을 드려 죄송합니다!! (꾸벅)
하,, 수업내용 이해가 안됐었는데,,ㅠㅠ 덕분에 다 이해하고 갑니다♥️♥️
감사합니다!
이해가 쏙쏙 되네요~~!!!감사합니다^^실전편도 만들어 주세요
최고예요!! 감사해요1!
감사합니다! :D
정말 쏙들어오는 설명 감사합니다.
설명듣다보니 마지막의 Ct값은 어찌 구하는지 궁금합니다. 알고있는 표준 DNA양도 같이 측정 후, 표준 DNA의 왼쪽 그래프는 DNA양이 많고 뒤쪽 그래프는 상대적으로 적은건가요?
아니면 기계가 형광세기로 알아서 세어주나요?
그리고 threshold 설정의 기준이 있을까요?
Ct값은 형광이 증폭되는 시점을 토대로 그려지는 Threshold 값을 바탕으로 구해지며, Threshold는 유의미한 결과를 관찰할 수 있는 부분에 설정되게 됩니다. 대부분의 Real-time PCR 장비의 경우 baseline 표준편차값 대비 약 10배 정도의 형광이 관찰되는 부분을 thereshold가 되도록 설정되어 있습니다.
real time PCR과 reverse transcriptase PCR은 같은 건가요..?
7:14 에서 같은 dna 양인 threshold 구간에서 앞에 있는 그래프가 더 상대적으로 dna 양이 많다고 하셨는데 그 상대적인 dna양에서 dna는 dna templet이 맞나요??
자세한 설명감사합니다!
질문이 하나 있는데요. qPCR시 Reporter dye가 떨어져나가면서 형광을 내는거 까지는 이해가 되었습니다. 근데 Reporter dye 분자안에 형광을 내는 원자가 1개 존재하나요 아니면 여러개 존재하나요??
이론적으로는 유전자 하나가 증폭되면 1개의 형광 원자가 발현되도록 설계되어 있습니다. 그래야 유전자 증폭과 형광 signal이 비례하게 증가할 수 있기 때문이죠!
너무 좋은 영상입니다.. 구독, 좋아요 했어요ㅎㅎ어디 후원 받아서 하는건가요?
응원 댓글 감사 드립니다! 별도로 후원받는건 아니고, 바이오 업체 (주)서린바이오사이언스에서 주관하는 유투부 채널입니다! :D
안녕하세요! 그럼 taqman probe는 상보적 염기서열과 결합하여 형광을 나타내는 것인가요?
qPcr 결과해석 관해서도 설명부탁드려요
네~추후에 기회가 된다면 제작해보도록 하겠습니다!
qPCR 사용중인데 Cycle이 끝나갈때쯤 Threshold 근처까지만 커브를 형성하는 것은 해당균이 있다고 봐야하나요? 결과해석이 헷갈립니다...
Jason Lee님! 댓글 감사합니다!
일단 커브를 형성한다는 것은 해당 균이 미미하지만 존재한다는 것을 뜻하지만, 결과값을 확인하지 못해 정확한 답변을 드리지 못하는 점 양해 부탁드리겠습니다.😥
dna한개가 정확히 무슨뜻이죠?
리얼타임pcr이 실시간pcr이랑 같은 건가요??
네네, 같습니다!