"Krang Lee"님 안녕하세요. 네, 그런 의미로 만든 영상입니다. 다만, 최대 흡수 피크가 아닌 다른 피크를 이용해서 정량을 할 경우, 몇가지 추가적인 설명이 필요한데요;; 해당 사항에 대해서는, 다른 영상에서 설명드릴게요! 우선은 사용할 최대 흡수 피크가 0.1-1.0 사이에 존재하는 것이 권장된다라고만 기억 해주시면 될 것 같아요!
영상 잘 보고 있습니다. 저는 요즘 bacteria의 농도에 대한 실험을 진행하고 있는데요. 600nm에서 OD값을 측정하고 있는데, 시료에 antibacterial effect를 가지는 polymer를 함께 넣어서 측정합니다. 근데 해당 polymer가 충분히 suspension되지 않는 것 같은데.. soluble한 농도에서 진행을 해도 OD값이 튀더라구요. background로 solvent+polymer를 잡고 sample (solvent+polymer+bacteria)를 측정하면 값이 제각각입니다. 이런 경우에는 어떻게 해야할까요? polymer의 농도는 최대 10 uM입니다.
"샌브루노"님 안녕하세요. Bactria growth curve측정을 하시나봐요. 비인간적인 시간 간격으로 측정하는 것만 기억나요;; 다만 다른방에서 측정하는 것만 들었지, 직접 실험하지는 못해 자세한 설명은 못드리겠네요. 그래도 조언을 드린다면, 측정전에 polymer를 제거하는 방법입니다. growth curve 실험은 배양시키면서, 대개 조금씩 분취해서 바로 측정하는 것으로 알고있는데요. Polymer가 문제가 된다면 제거하고 실험해야죠. Polymer정보가 없어 잘은 모르지만, 적절한 기공 크기의 filtering이나 알맞은 조건의 centrifuge를 수행하면 polymer와 bacteria의 분리가 될겁니다. 물론 growth curve 실험중이니 빠르게 수행해야겠지만요. 아마, bactria관련 실험 논문을 찾아보면 다른 방식의 UV측정전 sampling 기법이 많이 나올 꺼예요. 조사하고 참고해서 실험을 수행하면 좋을 것 같아요! 분석기기 setting보다는 sampling쪽으로 접근해보세요!
화학 튜터님! 작년에 이영상보고 공부하고 측정하면서 궁금한점이 생겨 다시 왔습니다. :) 제가 천연염료 (메탄올로 추출, 선행연구에서의 최대흡광피크 480, 510 nm) 를 대상으로 UV-VIS(250-800), 흡광범위 0.0~1.0으로 설정하고 측정했습니다. 그런데 500 nm 초반에 들어서면서 그래프가 일직선으로 쭉올라가며 흡광도가 3을 초과해버리면서 더 이상의 그래프 형태가 나타나지 않았습니다 ㅠㅠ 이럴 땐 튜터님께서 말씀해주신대로 미광의 문제이거나 시료 자체의 농도가 짙어서 라고 저는 이해했는데요, 만일 시료를 메탄올 (메탄올로 추출한 시료이기 때문)을 더 첨가하여 희석시킨다면 시료의 색상이 점점 연하게 바뀌게 되는데.. 이렇게 되면 색상에 반응하는 VIS 값이 원래 측정하고자 하였던 샘플과 색상이 달라 오류가 나지 않을까 생각됩니다. 이래저래 고민도 생각도 많이 드는데 뭔가 물어볼 곳이 없어 튜터님께 여쭤봅니다 ㅠㅠ.. 감사합니다!
"오성민"님 안녕하세요. 천연염료를 이용한 실험에서, 일반적으로 희석하면서 문제가 발생하지는 않습니다. 희석 전후로 색변화는 생기지만, 그건 단순히 농도가 묽어지는 것이지 다른 변화가 유발되는 것은 아니니까요. 희석 배수만 정확히 기록하고, 측정 후 흡광도 계산에 사용하시면 아무런 문제도 없다고 생각합니다.
@@choijaesun 답변 감사합니다. 그런데 희석하면서 색상이 달라지는데 그러면 흡수하는 색이 달라지므로 파장대도 다르게 나오지 않을까요? 예를 들어 연주황색이던 샘플이 510 nm에서 최대흡광을 가지는데 희석하면서 노란색이 되므로 그에 따른 파장대가 달라질 거 같아서요 ㅠㅠ..
@@오성민-m1y 님 안녕하세요. 희석에 따라서 색이 변하는 경우는 특이한 경우인데요. 원 용액의 용매와 동일한 용매로 희석할 경우, 최대 흡광 파장이나 몰당 흡광 계수의 변화는 없어야 합니다. 혹, 희석에 따른 흡광도의 변화로 색이 변하는 것처럼 느껴질 수 있는데요. 예를들어 검은 색인 에스프레소를 물을 넣어서 희석하면 갈색의 아메리카노가 되는 식으로요. 희석에 따른 색 변화가 걱정된다면 흡광도 1이하로, 0.1-0.01이 될때까지 희석을 진행한 후 농도별 흡광도를 모두 측정해보세요. 희석과정에서 물질의 특성변화(aggregation, dimer etc.)가 없다면 최대 흡광파장은 동일하며 흡광도만 감소하는 개형의 스펙트럼 set을 얻을 거예요.
안녕하세요, Alq3를 합성 한 후 농도별 흡광도를 측정 하였습니다. 비어-렘버트 법칙을 이용하여 흡광계수를 구해야하는데, 각 농도별 몰흡광계수를 구한후 평균을 구해줬는데.. 이런 방식으로 구하면 안되는걸까요?? 추세선을 그려봤는데 0,0을 지나지 않고 y=1.35x+0.195가 나와 기울기가 1.35인데.. 평균으로 구한 몰흡광계수는 2.39로 꽤 차이가 나서요ㅠㅠㅠㅠ 감사합니다
"쭁잉"님 안녕하세요. 개인적인 일이 많아서 답변이 늦었네요; ㅎㅎ 사실 이상적인 용액이면 몰흡광계수가 일정합니다. 농도별로 변하면 몰흡광계수가 아닌거죠. 혹시 농도가 너무 높거나? 실험중 다른 특이 사항은 없었는지 궁금하네요. 우선 저도 자세한 실험과정에 대해 알아야 답변을 드릴수가 있을 것 같아요!
![[분석화학] NMR Spectroscopy - NMR solvent, 용매의 조건](http://i.ytimg.com/vi/i3-rZmaRxvU/mqdefault.jpg)
![[분석화학] NMR Spectroscopy - NMR solvent, 용매의 조건](/img/tr.png)
![[분석화학] Raman Spectroscopy - Raman 장비의 구성](http://i.ytimg.com/vi/cPkFhNCrong/mqdefault.jpg)
![[수질분석 33] 흡광광도계의 구조 spectrophotometer](http://i.ytimg.com/vi/gCgKusTLrng/mqdefault.jpg)
항상 감사드립니다! 기기분석이나 분석화학의 원리 없이 화학보고서를 쓰곤 할때 이렇게 '시료를 왜 희석해서 사용해야 하는가?'와 같은 본질적인 질문에 봉착하면 아주 당황스러운데 이렇게 강의로 설명해주시니까 정말 도움이 많이 되네요ㅎㅎ
"박사오"님 안녕하세요.
제가 흥미로 취미로 올리는 영상이, 다른분들에게 도움이 된다는 참 고맙네요.
친절한 댓글 감사합니다!
예전에 올린 "흡광도 1 이하로 측정해야하는 이유" 기기편의 후속 영상 입니다. 시간은 오래 걸렸지만, 이 영상이 UV 활용에 도움이 되길 바랍니다! 즐거운 한 주 보내세요!
저도 연구를 하며 흡광도 0.6 내외로 찍으라는 말만 듣고 그 이유를 몰랐는데 궁금증이 해결됐습니다. 감사합니다.
"최현석"님 감사합니다 ㅎㅎ
화학지식도 없는데 정말 흥미진진합니다. 감사합니다.👍
"nerd 999"님 격려 감사합니다. ㅎㅎ
와.. 이거 궁금했는데 이렇게 알려주시다니 감사합니다
"pOCo"님 고마운 댓글 감사합니다!
이렇게 자세히 가르쳐주셔서 정말 감사합니다..!! 보고서 쓰는 데 큰 도움이 됬어요!! 감사합니다~~~!!!
"숨ruach"님 댓글 감사합니다!
보고서를 정성스럽게 쓰시는 것 같아요! 제 영상이 작게나마 도움이 되었으면 좋겠습니다 ㅎㅎ
막연히 뭐할때 측정한다만 알고있었는데 이렇게 이해가 쉽게 되도록 설명해주셔서 정말 감사드려요 :D 앞으로 연구하는데 있어 큰 도움이 될 것 같아요 ㅎㅎ
"오성민"님 친절한 댓글 감사합니다! ㅎㅎ
감사합니다.
"냐냐냐"님 시청해 주셔서 감사드립니다!
감사합니다! 공부하는데 도움 정말 많이 됩니다!!
"Hwan"님 댓글 감사합니다. 힘내서 다른 영상들도 만들께요!!
안녕하세요! 혹시 자료나 정보의 출처를 알 수 있을까요?
안녕하세요, 0.1-1 사이로 하라는 것은, 즉 최대흡수피크의 흡광도값이 0.1-1 사이가 되도록 하라는 말씀이시죠?
"Krang Lee"님 안녕하세요.
네, 그런 의미로 만든 영상입니다.
다만, 최대 흡수 피크가 아닌 다른 피크를 이용해서 정량을 할 경우, 몇가지 추가적인 설명이 필요한데요;; 해당 사항에 대해서는, 다른 영상에서 설명드릴게요!
우선은 사용할 최대 흡수 피크가 0.1-1.0 사이에 존재하는 것이 권장된다라고만 기억 해주시면 될 것 같아요!
화학 튜터님 저 그래프나 그림들 어떤 앱으로 만드는 건지 알려주실 수 있을까요?
"이지웅"님 안녕하세요. 여러번 받은 질문인데요; PPT로 만들고 있어요.
제가 따로 이미지툴을 배운적이 없어서요. 지웅님도 PPT로 이리저리 그림을 만들어보시면 잘 만드실 수 있을거에요!
영상 잘 보고 있습니다. 저는 요즘 bacteria의 농도에 대한 실험을 진행하고 있는데요. 600nm에서 OD값을 측정하고 있는데, 시료에 antibacterial effect를 가지는 polymer를 함께 넣어서 측정합니다. 근데 해당 polymer가 충분히 suspension되지 않는 것 같은데.. soluble한 농도에서 진행을 해도 OD값이 튀더라구요. background로 solvent+polymer를 잡고 sample (solvent+polymer+bacteria)를 측정하면 값이 제각각입니다. 이런 경우에는 어떻게 해야할까요? polymer의 농도는 최대 10 uM입니다.
"샌브루노"님 안녕하세요. Bactria growth curve측정을 하시나봐요. 비인간적인 시간 간격으로 측정하는 것만 기억나요;;
다만 다른방에서 측정하는 것만 들었지, 직접 실험하지는 못해 자세한 설명은 못드리겠네요.
그래도 조언을 드린다면, 측정전에 polymer를 제거하는 방법입니다. growth curve 실험은 배양시키면서, 대개 조금씩 분취해서 바로 측정하는 것으로 알고있는데요. Polymer가 문제가 된다면 제거하고 실험해야죠.
Polymer정보가 없어 잘은 모르지만, 적절한 기공 크기의 filtering이나 알맞은 조건의 centrifuge를 수행하면 polymer와 bacteria의 분리가 될겁니다. 물론 growth curve 실험중이니 빠르게 수행해야겠지만요.
아마, bactria관련 실험 논문을 찾아보면 다른 방식의 UV측정전 sampling 기법이 많이 나올 꺼예요. 조사하고 참고해서 실험을 수행하면 좋을 것 같아요!
분석기기 setting보다는 sampling쪽으로 접근해보세요!
화학 튜터님! 작년에 이영상보고 공부하고 측정하면서 궁금한점이 생겨 다시 왔습니다. :)
제가 천연염료 (메탄올로 추출, 선행연구에서의 최대흡광피크 480, 510 nm) 를 대상으로 UV-VIS(250-800), 흡광범위 0.0~1.0으로 설정하고 측정했습니다. 그런데 500 nm 초반에 들어서면서 그래프가 일직선으로 쭉올라가며 흡광도가 3을 초과해버리면서 더 이상의 그래프 형태가 나타나지 않았습니다 ㅠㅠ
이럴 땐 튜터님께서 말씀해주신대로 미광의 문제이거나 시료 자체의 농도가 짙어서 라고 저는 이해했는데요, 만일 시료를 메탄올 (메탄올로 추출한 시료이기 때문)을 더 첨가하여 희석시킨다면 시료의 색상이 점점 연하게 바뀌게 되는데.. 이렇게 되면 색상에 반응하는 VIS 값이 원래 측정하고자 하였던 샘플과 색상이 달라 오류가 나지 않을까 생각됩니다.
이래저래 고민도 생각도 많이 드는데 뭔가 물어볼 곳이 없어 튜터님께 여쭤봅니다 ㅠㅠ.. 감사합니다!
"오성민"님 안녕하세요.
천연염료를 이용한 실험에서, 일반적으로 희석하면서 문제가 발생하지는 않습니다. 희석 전후로 색변화는 생기지만, 그건 단순히 농도가 묽어지는 것이지 다른 변화가 유발되는 것은 아니니까요.
희석 배수만 정확히 기록하고, 측정 후 흡광도 계산에 사용하시면 아무런 문제도 없다고 생각합니다.
@@choijaesun 답변 감사합니다. 그런데 희석하면서 색상이 달라지는데 그러면 흡수하는 색이 달라지므로 파장대도 다르게 나오지 않을까요? 예를 들어 연주황색이던 샘플이 510 nm에서 최대흡광을 가지는데 희석하면서 노란색이 되므로 그에 따른 파장대가 달라질 거 같아서요 ㅠㅠ..
@@오성민-m1y 님 안녕하세요.
희석에 따라서 색이 변하는 경우는 특이한 경우인데요. 원 용액의 용매와 동일한 용매로 희석할 경우, 최대 흡광 파장이나 몰당 흡광 계수의 변화는 없어야 합니다.
혹, 희석에 따른 흡광도의 변화로 색이 변하는 것처럼 느껴질 수 있는데요.
예를들어 검은 색인 에스프레소를 물을 넣어서 희석하면 갈색의 아메리카노가 되는 식으로요.
희석에 따른 색 변화가 걱정된다면 흡광도 1이하로, 0.1-0.01이 될때까지 희석을 진행한 후 농도별 흡광도를 모두 측정해보세요. 희석과정에서 물질의 특성변화(aggregation, dimer etc.)가 없다면 최대 흡광파장은 동일하며 흡광도만 감소하는 개형의 스펙트럼 set을 얻을 거예요.
@@choijaesun감사합니다! 한번 시도해보겠습니다 :D
안녕하세요, Alq3를 합성 한 후 농도별 흡광도를 측정 하였습니다. 비어-렘버트 법칙을 이용하여 흡광계수를 구해야하는데, 각 농도별 몰흡광계수를 구한후 평균을 구해줬는데.. 이런 방식으로 구하면 안되는걸까요??
추세선을 그려봤는데 0,0을 지나지 않고 y=1.35x+0.195가 나와 기울기가 1.35인데..
평균으로 구한 몰흡광계수는 2.39로 꽤 차이가 나서요ㅠㅠㅠㅠ
감사합니다
"쭁잉"님 안녕하세요. 개인적인 일이 많아서 답변이 늦었네요; ㅎㅎ
사실 이상적인 용액이면 몰흡광계수가 일정합니다. 농도별로 변하면 몰흡광계수가 아닌거죠.
혹시 농도가 너무 높거나? 실험중 다른 특이 사항은 없었는지 궁금하네요. 우선 저도 자세한 실험과정에 대해 알아야 답변을 드릴수가 있을 것 같아요!