궁금한 점이 있습니다. 4:05 에서 qPCR 용액를 조제할 때 sybr : DW : Primer = 5: 3: 1 비율로 넣는다고 되어있는데 이것은 고정값인가요 아니면 랩실마다 조건이 다른건가요? 2X SYBR Green master mix 프로토콜에는 master mix 과 총 용액 volume만 고정 값으로 되어있어 혹시 이 댓글 보신 분 중에 알려주실 수 있는 분이 있으신지요ㅠㅠㅠ
아마 다뤄야 하는 시약들이 차가운 상태에 있어야 변하지 않기 떄문일꺼구요, 제일 중요한것은(결과가 흔들릴때 거론되는 이유중하나이기도) 유전자 시료(RNA,cDNA)와 primer가 온도가 조금만 올라가도 변하는 예민한 시료들이기 때문이겠죠. 그러니 저 시약들을 일일이 섞어주고 있는 상황에서도 온도를 올리기 싫어서 얼음에 밖아 넣은 상태로 진행한거일거구요...
![[대상]RNA-seq analysis를 통한 후성유전학 연구](/img/1.gif)
좋은 정보 감사합니다
I m not sure, you’re still here. I m curious, could you tell about the final concentration of cDNA?
궁금한 점이 있습니다. 4:05 에서 qPCR 용액를 조제할 때 sybr : DW : Primer = 5: 3: 1 비율로 넣는다고 되어있는데 이것은 고정값인가요 아니면 랩실마다 조건이 다른건가요? 2X SYBR Green master mix 프로토콜에는 master mix 과 총 용액 volume만 고정 값으로 되어있어 혹시 이 댓글 보신 분 중에 알려주실 수 있는 분이 있으신지요ㅠㅠㅠ
얼음에 왜넣어두나요?
아마 다뤄야 하는 시약들이 차가운 상태에 있어야 변하지 않기 떄문일꺼구요, 제일 중요한것은(결과가 흔들릴때 거론되는 이유중하나이기도) 유전자 시료(RNA,cDNA)와 primer가 온도가 조금만 올라가도 변하는 예민한 시료들이기 때문이겠죠. 그러니 저 시약들을 일일이 섞어주고 있는 상황에서도 온도를 올리기 싫어서 얼음에 밖아 넣은 상태로 진행한거일거구요...
@@user-redpill 유전자시료가 왜변해요?
@@user-redpill 근본적인 이유좀 알수있을까요.?
pcr원리를 찿아보심 됨