Détection des protéines spécifiques par WESTERN BLOT : Principe et Protocole | Biochimie Facile
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- Опубликовано: 12 сен 2024
- Détection des protéines spécifiques par WESTERN BLOT | Biochimie Facile
Bonjour !
Dans cette vidéo de biochimie facile on va voir une technique de biochimie des protéines et de biologie cellulaire, la technique du Western Blot, appelée également immunoblot. Le principe du Western Blot, couramment utilisé pour la détection des protéines spécifiques d'un mélange complexe ou d'un extrait cellulaire, est basé sur la spécificité des anticorps vis-à-vis des protéines données. Dans cette vidéo, je détaille le principe et le protocole du Western Blot.
Pour voir en détail le principe de l'électrophorèse SDS-PAGE, voici le lien de ma vidéo précédente qui parle de cette technique :
• Séparation des protéin...
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A bientôt !
Je vous félicite pour l'excellente qualité de vos vidéos et de votre présentation orale très claire et explicite. Merci beaucoup.
Merci beaucoup pour votre commentaire ça me fait plaisir ☺️
Merci beaucoup ! Qui que vous soyez , c'est vraiment très simplement expliqué
Merci beaucoup pour ces vidéos qui nous aident à mieux comprendre nos cours
Tres bonne vidéo, bien structurée, bien imaginée, elle m’a beaucoup aidée ! Merci beaucoup !
Merci ☺️
Merci beaucoup pour cette simple et magnifique explication ❤❤❤
qui que vous soyez , je vous en suis éperdument reconnaissante.
Merci beaucoup, ça m'a beaucoup aidé pour les révisions
merçi bouceaup j'ai compris toutes les etapes de cette technique💚
Génial ! Très contente que la vidéo vous a été utile ☺ n'hésitez pas à la partager avec vos amis biochimistes 😀 merci beaucoup et bon courage
Vous êtes vraiment super ! ❤❤❤ MERCII
Merci beaucoup pour cette vidéo
Bonjour, merci pour cette video tres claire. Continuez comme cela. Patrick
Merci beaucoup pour votre commentaire !
VIDEO PARFAITE MERCI ❤❤❤❤
Vos vidéos sont très utiles ❤❤❤😊
Merci beaucoup 😊
Merci à vous 🤗
Je vous remercie infiniment
Avec plaisir :)
Merci pour votre explication
Bonjour, merci pour toutes les vidéos ! Petite question : comment se fait-il que parfois, on observe une coloration bleu continue au niveau de certains puits ? Je vous remercie par avance pour votre réponse !
Bonjour merci pour votre commentaire 😍
Cela peut être dû à une trop grande quantité de protéines déposées sur le gel. En général pour avoir de belles bandes en coloration Coomassie il faut déposer entre 2 et 5 microgrammes de protéine par piste.
D'accord, je vous remercie pour votre réponse et je vous souhaite une très bonne continuation ! 😊
@@justine7325 merci beaucoup, à vous aussi
Merci beaucoup pour la vidéo.
Est ce que vous pouvez faire la réalisation même de ce que vous expliquez au laboratoire svp
Merci pour votre vidéo cela m'aide beaucoup dans ma formation de Bio-informatique.
Ma question est de savoir pourquoi l'anticorps primaire n'est pas en même temps couplé au fluorophore pour détecter la protéine d'intérêt .Merci
j'ai la meme question
merci, cela m'a aider à comprendre la technique, juste vous avez inversé les pôles de migration anode cathode.
Vidéo parfaite mais possible de faire un exemple mais au laboratoire.🙏🙏
je Vous remercie
Avec plaisir ☺️
Bonjour, n'est-il pas possible de coupler directement l'anticorps primaire avec un produit luminescent ? Je ne comprends pas bien l'intérêt de l'anticorps secondaire.
Alors oui c’est possible pour certains anti-corps. Par exemple j’utilise régulièrement l’anticorps anti-His couplé à la HRP qui permet de détecter le tag hexahistidine des protéines recombinantes. Cependant il n’est pas possible de coupler tous les anticorps avec des enzymes permettant la révélation, d’où la nécessité d’avoir un anticorps secondaire.
@@BiochimieFacile super merci beaucoup !!
🔴🔴 Combien le temps de diagnostic par cette technique pour "la taxoplasmose" svvpppp ??
Merci
concernant le transfert liquide quel est la nature de liquide?et merçi
Le tampon de transfert contient : du Tris, de la glycine, du SDS et soit du méthanol ou de l'éthanol (le méthanol étant de moins en moins utilisé car toxique).
Bonjour, je n'arrive pas à pourquoi la bsa ou le lait va entraîner le blocage des autres protéines qui ne se trouvent pas à 50 kda😊
Bonjour,
En fait la BSA ou le lait (contenant les protéines de lait) sont utilisés pour bloquer (c'est à dire à occuper) les sites non spécifiques de fixation des protéines sur la membrane. En effet la membrane utilisée en western blot est très sensible pour lier des protéines. Or, les anticorps qu'on utilise pour la révélation sont également des protéines. Ainsi en bloquant les sites non occupés sur la membrane par la BSA ou les protéines de lait, on empêche les anticorps de se fixer ailleurs que sur notre protéine d'intérêt.
Maintenant en ce qui concerne la taille des protéines, celle-ci ne joue aucun rôle lors du blocage et de la revelation car les protéines sont séparées par migration sur gel sds-page. La membrane ne sépare pas les protéines en fonction de la taille, n'importe quelle protéine peut se fixer sur n'importe quel site non occupé sur la membrane. C'est pourquoi il faut toujours manipuler la membrane avec des gants et avec une pince pour éviter la contamination par la keratine par exemple 😊
J'espère que mes explications ne sont pas trop confuses. N'hésite pas si tu as d'autres questions 😊
@@BiochimieFacile merci beaucoup de votre réponse je vais relire mon cours mais deja votre vidéo m'a beaucoup aidé car c est pas facile de comprendre le western southern et Northern blot 😊
@@victorlecomte4501 bon courage et n'hésite pas à me redemander si qqch n'est pas clair 😊
❤️
La vidéo est pas mal
Mrc bq
Cathode c est le pole positive pas négative!!! Cations +++