раньше был метод: брали эксикатор, зажигали там свечу, частично выгорал кислород и ставили в термостат на 37 градусов. Фиброблатсам хватит, нейроклеткам - нет.
Интересно было бы про колонию растительных культур. Когда-то выращивал хлореллу с ней естественно намного проще. Можно выращивать смешанные культуры? Думаю потенциал такой технологии огромен.
Здравствуйте. Скажите пожалуйста амоксициллин подойдет в качестве антибиотика, стрептомицин трудно найти. Что можно применить вместо антимикотика ? Амфотерицин б тоже найти трудно. Культуральные флаконы вы зарытыми ставите в инкубатор или с открытой крышкой? Из чего можно взять первичный клеточный материал кроме мышей?
В принципе подойдёт. Антибиотик-антимикотик продаётся культуральный - 20 и 100 мл 10 кратного раствора цена где-то 15 долларов за 20 мл. Стрептомицин и амфотерицин есть в ветаптеках. Можно в растворе купить гатифлоксацин или ципрофлоксацин - с ними проще - 1 мл на 500 мл среды. Флаконы должны вентилироваться: ставить с закрытой крышкой, но не до упора, недовинчивая несколько витков. Они бывают с вентилируемой крышкой и фильтром - эти можно дотянуть. Кроме мышей можно взять плоды крыс или другого животного. Проще начать с фибробластов кожи плодов грызунов- они растут практически всегда.
@@prokopiukvolodymyr6630 Спасибо. Скажите какие преимущества культуральных флаконов над планшетами на 6 лунок или пластиковых чашек петри? Какие могут быть причины плохого прикрепления клеток к поверхности флакона после пересева? Имеет ли смысл сражаться за инфицированную культуру?, плавают черные включения.
Проблемно. 5% СО2 не сделаешь, проверял (там описана идея зажечь свечу, что бы кислород частично выгорел) . Хотя некоторые линии живучие, может получится в термостате.
Не совсем понял, почему они прилипли к стенкам. Но по отделению клеток: Версен (ЭТДА), можно с трипсином, но не обязательно. Механически максимум струёй среды из пипетки (набираете в том же флаконе и по нему "гоняете"). Все скребки не работают, они рвут клетки, выживаемость близка к нулю. Если клетки не приобрели шарообразную форму, Вы их не снимите.
@@prokopiukvolodymyr6630Спасибо. С водой действительно лучше отделяются. Механически попробовал постукивать по матрасу вроде тоже ускорило процесс. Хотя мб нужно больше ждать с трипсином.
Да, я так тоже пробовал. Для отработки методов пойдёт, но для длительных экспериментов вряд ли. Выростить культуру фибробластов или гепатоцитов до монослоя получится.
Да, там обычно объективы на 4, 10, 20, 40. то есть увеличение 40, 100, 200, 400. 250 - многовато, но реально. Удобнее 100-200. Главное, что бы был фазовый контраст, иначе плохо видно, но лучше чем ничего.
Огромное спасибо за все эти видео! Очень полезно новичку! Судя по всему это единственный на ютюбе русскоязычный мануал на такую тематику)
Спасибо!
Вот это подарок на Новый Год :) Спасибо за интересную информацию!
Пожалуйста. Там ещё десяток видео по теме для специалистов. Будут ещё и общие.
Классный канал🔥 Каждую неделю пересматриваю ваши видео👍🏻Очень ясно и понятно
Спасибо большое за видео!, все коротко, понятно и на русском)
Самое то, чтобы новичку получить общее понимание об этой интересной теме!)
спасибо вам большое! очень хочется этим заниматься🥺 надеюсь, найдется подходящая по интересам лаба с такими методами
Спасибо большое! Очень полезные видеоролики!
Спасибо за видео👍
Спасибо!
Вау) я искал все по крупицам )
Спасибо за материал )
Там дальше подробно по каждому разделу.
@@prokopiukvolodymyr6630 я уже ознакамливаюсь) спасибо))
Интересно, можно ли в домашних условиях сделать самопальный инкубатор
раньше был метод: брали эксикатор, зажигали там свечу, частично выгорал кислород и ставили в термостат на 37 градусов. Фиброблатсам хватит, нейроклеткам - нет.
Интересно было бы про колонию растительных культур. Когда-то выращивал хлореллу с ней естественно намного проще. Можно выращивать смешанные культуры? Думаю потенциал такой технологии огромен.
Здравствуйте. Скажите пожалуйста амоксициллин подойдет в качестве антибиотика, стрептомицин трудно найти. Что можно применить вместо антимикотика ? Амфотерицин б тоже найти трудно. Культуральные флаконы вы зарытыми ставите в инкубатор или с открытой крышкой? Из чего можно взять первичный клеточный материал кроме мышей?
В принципе подойдёт. Антибиотик-антимикотик продаётся культуральный - 20 и 100 мл 10 кратного раствора цена где-то 15 долларов за 20 мл. Стрептомицин и амфотерицин есть в ветаптеках. Можно в растворе купить гатифлоксацин или ципрофлоксацин - с ними проще - 1 мл на 500 мл среды. Флаконы должны вентилироваться: ставить с закрытой крышкой, но не до упора, недовинчивая несколько витков. Они бывают с вентилируемой крышкой и фильтром - эти можно дотянуть. Кроме мышей можно взять плоды крыс или другого животного. Проще начать с фибробластов кожи плодов грызунов- они растут практически всегда.
@@prokopiukvolodymyr6630 Спасибо. Скажите какие преимущества культуральных флаконов над планшетами на 6 лунок или пластиковых чашек петри?
Какие могут быть причины плохого прикрепления клеток к поверхности флакона после пересева?
Имеет ли смысл сражаться за инфицированную культуру?, плавают черные включения.
@@ВіталійВілівчук-щ3щ Есть по этому отдельное видео на канале - называется "культуральная посуда".
@@prokopiukvolodymyr6630 что нужно для культивирования клеток растений?
@@hellishnickolas6981 там всё совсем по другому. Посуда отдельная, среда типа агара и фитогормоны. Но в принципе реально.
СО2 инкубатор можно заменить эксикатором
Проблемно. 5% СО2 не сделаешь, проверял (там описана идея зажечь свечу, что бы кислород частично выгорел) . Хотя некоторые линии живучие, может получится в термостате.
@@prokopiukvolodymyr6630 СО2 для планшетов, чашек и матрасиков с фильтром,
А как клетки эндотелия со стенок матрасов сбивают если прилипли?
Не совсем понял, почему они прилипли к стенкам. Но по отделению клеток: Версен (ЭТДА), можно с трипсином, но не обязательно. Механически максимум струёй среды из пипетки (набираете в том же флаконе и по нему "гоняете"). Все скребки не работают, они рвут клетки, выживаемость близка к нулю. Если клетки не приобрели шарообразную форму, Вы их не снимите.
@@prokopiukvolodymyr6630Спасибо. С водой действительно лучше отделяются. Механически попробовал постукивать по матрасу вроде тоже ускорило процесс. Хотя мб нужно больше ждать с трипсином.
@@Константин1943 там даже не трипсин, а ЭТДА важнее. И хранится лучше и дольше и дешевле.
👍
А можно простой термостат переделать в инкубатор CO2?
нет, нельзя, но Вы можете использовать питательную среду с хепесом. Либо использовать эксикатор со свечкой, который будете ставить в свой термостат
Да, я так тоже пробовал. Для отработки методов пойдёт, но для длительных экспериментов вряд ли. Выростить культуру фибробластов или гепатоцитов до монослоя получится.
А увеличение 250x инвер. микроскопа подойдет для изучения клеточных культур?
Да, там обычно объективы на 4, 10, 20, 40. то есть увеличение 40, 100, 200, 400. 250 - многовато, но реально. Удобнее 100-200. Главное, что бы был фазовый контраст, иначе плохо видно, но лучше чем ничего.
@@prokopiukvolodymyr6630 Спасибо, а микроскоп инвертированный «Биолам П-1» подойдет?
Вроде должен подойти. Он для этого. Если комплектный.
@@prokopiukvolodymyr6630 Спасибо!
Это дорого(
Баба с жопой набираем лямы просмотров.. Вот такие видео должны быть в тренде!