Gram Gtte eau Colonie ds la gtte et ... fixation par la chaleur Cristal violet1min rincer Lugole inonder la lame 1 min rincer L'alcool 10 second rincer A safranine 1 min rincer Sécher Violet - rose +
Il entre dans les bactéries et se fixe au crystal violet. Ça rend le complexe crystal-violet-iode plus difficile à faire sortir à l’extérieur des bactéries Gram +.
Parce que le violet de cristal les colore de cette couleur. De plus, comme l’alcool n’a pas d’effet décolorant sur les bactéries Gram +, elles demeurent violettes après l’ajout d’alcool.
Lorsque la bactérie est bleu ou violette après la coloration (lorsqu’elle est observée au microscope), elle a une paroi de type Gram +. Si la bactérie est rose ou rouge, elle est Gram -.
belle initiative mais je suis étonnée après mes cours de microbiologie de voir certaines choses ... comme flamber seulement le bout de la boucle (risque de projection d'ou l'intérêt de commencer plus loin et arriver enfin à la boucle) et aussi de voir les colorants partir à l'évier ce qui n'est pas l'idéal pour l'environnement :(
Le bleu de méthylène n’est pas utilisé pour la coloration de Gram. Vous pouvez vous procurer ces solutions par le biais de compagnies vendant du matériel de laboratoire.
Cela dépend de la bactérie. Patmi les gram +, il y a tous les arrangements possibles: isolé, en groupe de deux, en chaîne (strepto) ou en grappe (staphylo).
Bravo pour votre vidéo qui est très bien faite et explicite. Cependant, à présent et depuis quelque temps maintenant il est interdit de flamber son GRAM pour le fixer car ceci pourrait provoquer la dispersion d'aérosols dans l'air et donc possiblement contaminé le manipulateur.
1. Cristal-violet: colore les bactéries en violet. 2. Iode: c’est un mordant qui se lie au cristal-violet et qui lui permet de de fixer dans les bactéries. 3. Alcool: c’est un décolorant qui détruit la membrane externe des Gram négatifs et qui provoque la sortie du complexe « cristal violet - iode ». 4. Safranine: c’est un contre-colorant qui permet de colorer les bactéries Gram négatives en rouge à cette étape.
D'après mon expérience, plusieurs raisons peuvent donner une coloration non-convaincante: Souvent c'est parce que trop de bactéries sont déposées sur la lame avant de procéder à la coloration. Ainsi, la coloration n'est pas uniforme sur toute la lame et la couleur des bactéries deviens ambiguë. Les lavages entre les colorants doivent aussi être complets à défaut de quoi il reste des colorants de l'étape précédente. Il ne faut pas trop décolorer avec l'alcool puisque ça peut faire sortir la coloration violette des bactéries Gram + à cette étape si le temps de décoloration est trop long.
Bonjour je ne suis pas d’accord avec son protocole. Sont bec bunsen n’est pas en flamme chauffante mais en flamme éclairante se qui ne lui permet donc pas de travailler en conditions aseptique, après avoir récolté une culture isolée il dois ensuite appliquer sur sa lame la culture en faisant un mouvement d’oscillation or il ne l’a pas fais. Je suis désolé mais je ne vous recommande pas de suivre le protocole de cette vidéo.
Merci pour votre commentaire. L’efficacité d’un champ stérile d’une flamme « jaune » plutôt que « bleue » est la même. Ainsi, cela permet tout autant de travailler en champ stérile. Le but du frottis sur la lame est d’y déposer des bactéries. Ce résultat sera obtenu que vous déposiez vos bactéries en formant un mouvement d’oscillation ou non. Ainsi, la technique pour déposer les bactéries sur la lame importe peu ici.
en règle générale si, il suffit de regarder les pictogramme présent sur les flacons de produits et tu comprendras ceci dit la concentration des produits varie beaucoup d'un labo a un autre donc le port des gants est variable il faut s'adapter à sa situation
Les gants sont s’enflamme facilement, il est donc dangereux de les porter avec un bec bunsen Le port de gants, c’est seulement sous PSM (poste sécurité microbiologie), qui permet d’éviter les contamination externes
Le port des gants est recommandé pendant l'étape de la coloration seulement. Lors de la fixation de la lame à la chaleur, il pourrait effectivement être dangereux d'en porter au cas où ils s'enflammeraient.
Il est dangereux de porter des gants avec le bec Busen. Dans min labo, c'est préciser dans les règles de sécurité. Je pense que c'est parce que le latex brûle facilement Tu as donc tout intérêt à bien te laver les mains si tu as manipuler des bactéries
Gram
Gtte eau
Colonie ds la gtte et ... fixation par la chaleur
Cristal violet1min rincer
Lugole inonder la lame 1 min rincer
L'alcool 10 second rincer
A safranine 1 min rincer
Sécher
Violet - rose +
Waouou explication bien faite et très claire.Chapeau
Merci beaucoup
La meilleure vidéo dont cette expérience est trop bien expliquée simplement😁
Bien heureux d’apprendre que cette vidéo vous ait été utile! :)
Par contre ton accent j’ai eu un peu mal à comprendre certains mots mais merci beaucoup ta vidéo m’a aidé à mieux comprendre mon cours
Vous pouvez mettre les sous-titres di cela peut aider! :)
merci tellement pour vos efforts.
Vraiment C'est parfait !
Tout le plaisir est pour moi! N’hésitez pas d’écouter les vidéos sur les autres techniques de microbiologie!
Merci grâce a votre vidéo bien explicite je sais faire une coloration de gram merci beaucoup
Je suis bien heureux pour vous! ☺️
merci ça m'aide bcp "ziania yah"
merci beaucoup, c'est vraiment bien fait
Merci, par contre l'eau qui coule pour rien sa fait mal ...
Je suis bien d’accord. Il est préférable de couper l’eau entre les lavages. Je compte sur vous pour le faire!
l'eau c'est gratuit au Canada! :)))
LES BONNES MIROORGANISME
ruclips.net/video/N0q8Jot_qPc/видео.html
@@mariamemmi8943 Oui mais il ne faut pas gaspiller l'eau :)
@@mariamemmi8943 it's not in africa
Franchement woow merci beaucoup ❤️
De rien 😁
0:17 cela que je voudrais je vous remercie infiniment ❤❤😊😊
Tout le plaisir est pour moi! 😀
vraiment merci pour cette vidéo ,une bonne explication.
Merci à vous! 🙏
3:11 ♥♥
merci pour la vidéo! j'aurais aimé que vous fassiez la coloration de Ziehl-Neelson :3
Ça serait une bonne idée! :)
Merci bcp c'est très important et intéressant
Je suis d’accord avec vous que la coloration de Gram est très importante en microbiologie!
Super si vous trouvez cela intéressant! :)
J'aime ça ❤
Je suis Biologiste ceci me ramène à ma spécialité je valide.
Bien heureux que vous validiez! 😎
Super
Merci pour les informations
C’est un plaisir!
Merci pour les explications
Tout le plaisir est pour moi! 🙏
Bravo et merci .
Tout le plaisir est pour moi! N'hésitez pas à regarder mes autres vidéos de techniques microbiologiques: ruclips.net/user/microbiologiegarneau
Merci bcp sa ma bcp aider ❤ bonne continuation
Dr svp j’ai pas compris l’iode qu’est ce qu’il fait exacte 3:30 😢
Il entre dans les bactéries et se fixe au crystal violet. Ça rend le complexe crystal-violet-iode plus difficile à faire sortir à l’extérieur des bactéries Gram +.
merci
Merci beaucoup c'est parfait
Merci pour les bons mots! :)
Pourquoi les bactéries à gram positif sont sont beu où violet ?
Parce que le violet de cristal les colore de cette couleur. De plus, comme l’alcool n’a pas d’effet décolorant sur les bactéries Gram +, elles demeurent violettes après l’ajout d’alcool.
Merci beaucoup...
Bien heureux que cela vous aide dans vos travaux de microbiologie.
L'eau que vous avez mis,ce quelle eau?
C'est de l'eau du robinet. Il n'est pas nécessaire d'utiliser de l'eau stérile ou de l'eau distillée pour cette méthode.
Bien expliqué merci beaucoup. mais peut on sécher la lame à l'étuve après coloration si on ne dispose pas de papier buvard ?
Je ne vois pas pourquoi cela poserait un problème.
Cvp ma3lich tfahmni f les etaps
s'il vous plait c'est quoi le role du iode oup le lugol dans cette experience? merci d'avance
fixation de la coloration
Bien dit Leila. L'iode (ou lugol) sert effectivement de "mordant" en fixant la coloration donnée par le cristal violet.
fixation de la coloration par formation de complexe violet-lugol
Bonjour mes chers maîtres !
Je veux savoir est-ce que c'est possible de fixé la lame avec le méthanol à 90⁰ ?
Je n’en ai aucune idée…
Je sais qu'on peut le fixer avec de l'alcohol absolue ( alcohol 95 degré).
Merci infiniment
Tout le plaisir est pour moi! :)
Comment interpréter ces résultats ?
Lorsque la bactérie est bleu ou violette après la coloration (lorsqu’elle est observée au microscope), elle a une paroi de type Gram +. Si la bactérie est rose ou rouge, elle est Gram -.
merciii beaucoup :)
belle initiative mais je suis étonnée après mes cours de microbiologie de voir certaines choses ... comme flamber seulement le bout de la boucle (risque de projection d'ou l'intérêt de commencer plus loin et arriver enfin à la boucle) et aussi de voir les colorants partir à l'évier ce qui n'est pas l'idéal pour l'environnement :(
Effectivement, ce n’est pas la version la plus écologique de la coloration de Gram. Une récupération des produits serait nettement mieux!
Bonjour,
Merci pour ce tutoriel très intéressant.
Pouvez vous me me dire où je peux acheter ces 4 solutions ?
Le bleu de méthylène n'est pas utilisé ?
Le bleu de méthylène n’est pas utilisé pour la coloration de Gram.
Vous pouvez vous procurer ces solutions par le biais de compagnies vendant du matériel de laboratoire.
@@MicrobiologieGarneau
Merci pour votre réponse !
Je me lance dans la micro-bio de la bière. Tous vos tutoriels me sont très utiles :)
Ça c’est une belle utilisation de la microbiologie! 🙂
Quel est le mode de groupement des gram +
Cela dépend de la bactérie. Patmi les gram +, il y a tous les arrangements possibles: isolé, en groupe de deux, en chaîne (strepto) ou en grappe (staphylo).
bravo et mecri
Mrc
C'est un plaisir! :)
merci bcp
Bonjour, le sechage de la lame sur la flamme se fait de quel côté, le cote avec les bacteries?
Le côté opposé des bactéries. Le but ici est de les coller sur la lame et non de les brûler.
Microbiologie Garneau merci de votre réponse super rapide, j'ai un TP de microbio cette apres-midi et votre video m'a bien aidé!
Bravo pour votre vidéo qui est très bien faite et explicite. Cependant, à présent et depuis quelque temps maintenant il est interdit de flamber son GRAM pour le fixer car ceci pourrait provoquer la dispersion d'aérosols dans l'air et donc possiblement contaminé le manipulateur.
Il est conseiller de fixer son GRAM avec de l'éthanol.
@@williamsegard7074 Intéressant comme commentaire. Ca fait du sens. Merci pour l'information!
Merc
est ce que les bactéries continuent a rispirer en absence d'oxygéne?
Certaines vivent très bien sans oxygène. Certaines font également de la fermentation dans ces conditions.
@@MicrobiologieGarneau mais en général est ce que on peut parler de la respiration sans oxygène?
@@lailaaatare917 On peut effectivement utiliser le terme "respiration anaérobie" pour parler d'un mode de vie sans oxygène.
Est ce que vous mettez vraiment tous ces colorants dans le lavabo ? Je ne pense pas que ce soit recommandable.
J'avoue que ça porte à réflexion. Auriez-vous une suggestion d'amélioration? Que faites-vous dans votre laboratoire?
Pouvez vous écrire le rôle des quatre colorant , j'ai besoin
1. Cristal-violet: colore les bactéries en violet.
2. Iode: c’est un mordant qui se lie au cristal-violet et qui lui permet de de fixer dans les bactéries.
3. Alcool: c’est un décolorant qui détruit la membrane externe des Gram négatifs et qui provoque la sortie du complexe « cristal violet - iode ».
4. Safranine: c’est un contre-colorant qui permet de colorer les bactéries Gram négatives en rouge à cette étape.
quel est la différence biologique entre yaourt et yogourt ?
Aucune! Au Québec, nous utilisons le terme yogourt alors qu'ailleurs on utilise le terme yogourt!
svp c quoi le role de lavage en eau après chaque ètape??
C'est pour retirer l'excédent de colorant.
mercii bcp
Inutile d'insulter. Tu es ici chez toi cependant nous ne sommes pas au zoo. Donc apprend a te contenir.
GOOD
Svp qu'elle eau utilisée pour la suspension bactérienne ?
C’est de l’eau du robinet. N’importe quelle eau (stérile ou non) fonctionne.
C’est quoi la raison qu’ont les colores
Pour déterminer leur type de paroi (Gram + ou Gram -)
Quel est l'objectif de ce tp?
Connaître le type de paroi des bactéries, c'est-à-dire si elles sont Gram + ou Gram -.
i love his accent
C’est l’accent québécois! 😉
Une conclusion svp monsieur!
Quel genre de conclusion souhaiteriez vous? 🧐
pourquoi il ne faut pas laisser l'alcool plus de 10 secondes ?
Nous avons observé que si on lave abondamment avec l'alcool, cela peut parfois décolorer complètement les bactéries gram + (dépend des espèces).
Quelle est la raison principale d une coloration gram non satisfaisante
D'après mon expérience, plusieurs raisons peuvent donner une coloration non-convaincante:
Souvent c'est parce que trop de bactéries sont déposées sur la lame avant de procéder à la coloration. Ainsi, la coloration n'est pas uniforme sur toute la lame et la couleur des bactéries deviens ambiguë.
Les lavages entre les colorants doivent aussi être complets à défaut de quoi il reste des colorants de l'étape précédente.
Il ne faut pas trop décolorer avec l'alcool puisque ça peut faire sortir la coloration violette des bactéries Gram + à cette étape si le temps de décoloration est trop long.
LES BONNES MICROORGANISMES
ruclips.net/video/N0q8Jot_qPc/видео.html
Cristal violet
Tout à fait, c’est le premier réactif à utiliser pour la coloration de Gram.
Y'a t'il des inconvénients à la coloration de gram ?
Que voulez-vous dire? Pouvez-vous préciser votre question?
Cristal violet tous les bac lugol alcool safranine
Slm chi technicien de laboratoire yduz privé j'ai des questions s'il vous plaît
Bonjour, je vous invite à me poser vos questions ici dans les commentaires.
Bonjour je ne suis pas d’accord avec son protocole. Sont bec bunsen n’est pas en flamme chauffante mais en flamme éclairante se qui ne lui permet donc pas de travailler en conditions aseptique, après avoir récolté une culture isolée il dois ensuite appliquer sur sa lame la culture en faisant un mouvement d’oscillation or il ne l’a pas fais. Je suis désolé mais je ne vous recommande pas de suivre le protocole de cette vidéo.
Merci pour votre commentaire. L’efficacité d’un champ stérile d’une flamme « jaune » plutôt que « bleue » est la même. Ainsi, cela permet tout autant de travailler en champ stérile.
Le but du frottis sur la lame est d’y déposer des bactéries. Ce résultat sera obtenu que vous déposiez vos bactéries en formant un mouvement d’oscillation ou non. Ainsi, la technique pour déposer les bactéries sur la lame importe peu ici.
@@MicrobiologieGarneau Merci de votre commentaire instructif. J' en prend note.
porcodio non se fa così
pourquoi les 4 deslike ?
Mystère! J'aimerais bien le savoir aussi! ;)
c'est tres bien presente mais la prochaine fois il faut les gants.
pas forcément besoin de gants pour un gram ^^
en règle générale si, il suffit de regarder les pictogramme présent sur les flacons de produits et tu comprendras ceci dit la concentration des produits varie beaucoup d'un labo a un autre donc le port des gants est variable il faut s'adapter à sa situation
Les gants sont s’enflamme facilement, il est donc dangereux de les porter avec un bec bunsen
Le port de gants, c’est seulement sous PSM (poste sécurité microbiologie), qui permet d’éviter les contamination externes
Le port des gants est recommandé pendant l'étape de la coloration seulement. Lors de la fixation de la lame à la chaleur, il pourrait effectivement être dangereux d'en porter au cas où ils s'enflammeraient.
Il est dangereux de porter des gants avec le bec Busen. Dans min labo, c'est préciser dans les règles de sécurité. Je pense que c'est parce que le latex brûle facilement
Tu as donc tout intérêt à bien te laver les mains si tu as manipuler des bactéries
Merci
Merci beaucoup
Merci beaucoup.
🙏