Boa noite! O processo de priorização de recombinantes através da defosforilação é feito tanto para extremidades abruptas quanto para extremidades coesivas? Pode ser realizado independente da enzima de restrição que foi usada?
@Julia Campanhole Sim! Pode ser feito com extremidades cegas ou coesivas! Todas as enzimas vão deixar o fosfato na 5' após o corte, logo, com qualquer enzima você pode usar uma fosfatase. Só lembrar que é para remover o fosfato do vetor, mas nunca do inserto! Se vai clonar com pontas cegas um produto do PCR é importante fosforilar o mesmo (o produto da PCR ou os primers!)
![Seungmin "그렇게, 천천히, 우리(As we are)" | [Stray Kids : SKZ-PLAYER]](http://i.ytimg.com/vi/kAzmhLHePqU/mqdefault.jpg)
excelente aula! didática ótima
muito bom !
Boa noite! O processo de priorização de recombinantes através da defosforilação é feito tanto para extremidades abruptas quanto para extremidades coesivas? Pode ser realizado independente da enzima de restrição que foi usada?
@Julia Campanhole Sim! Pode ser feito com extremidades cegas ou coesivas! Todas as enzimas vão deixar o fosfato na 5' após o corte, logo, com qualquer enzima você pode usar uma fosfatase. Só lembrar que é para remover o fosfato do vetor, mas nunca do inserto! Se vai clonar com pontas cegas um produto do PCR é importante fosforilar o mesmo (o produto da PCR ou os primers!)
@@adamoski Muito obrigada e parabéns pelas aulas, são ótimas!