Vale a pena fazer corridas de baixo volume para economizar reagente?

Você que faz ou está se preparando para fazer PCR em tempo real deve saber que os reagentes desta técnica são caros pra caramba, certo?
É por isso que quando a gente vê que o protocolo pede uma reação de 50 µL, a primeira coisa que vem na cabeça é:
“E se eu usar metade dos reagentes?”
Aí você vai lá e faz uma reação de 25 µL que funciona lindamente. Obviamente, o que você pensa em seguida é:
“E se eu usar metade da metade dos reagentes?”
Aí você vai lá e faz uma reação de 12,5 µL que funciona lindamente também.
É uma bela de uma economia, certo? Mas será que não tem algo de errado com isso? Será que que lá na reação não está acontecendo alguma coisa de ruim que você não esteja percebendo?
Pois esse é o tema deste vídeo!
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Seria interessante então fazer uma caracterização do termociclador, de forma parecida com o que foi feito no artigo e tornar esses dados publicos ao pessoal que usa a máquina/reagentes. Isso poderia ajudar a tomada de decisão de teduzir escala ou dar preferência a uma determinada area de poços da placa.

[@UniversodaBioMol]

A boa notícia é que o fabricante do termociclador deve informar qual é a uniformidade de temperatura do bloco ao longo dos poços. Inclusive, para alguns casos, existe kits de verificação da uniformidade.