Olá, você falou que a sonda se liga antes dos primers. Mas na PCR one step onde a transcriptase reversa precisa dos primers para poder fazer a síntese de cDNA complementar isso acontece simultâneamente? Ou mesmo assim a sonda se liga antes também? Poderia explicar? Obrigada...
Como que eu normalizo dados de sondas específicas de um microRNA? por exemplo: eu preciso normalizar com U6, certo? Como fazer isso? Eu preciso comprar uma sonda pra U6 tb? Ou eu uso a sonda TaqMan pra o microRNA de interesse e uso outra coisapra o U6???
Se vc já descobriu que o U6 será um bom normalizador (para isso vc deve testar, pois não há gene de referência universal), você vai precisar de um ensaio (dois primers e uma sonda) específico para o U6. Esse ensaio você pode correr separado do seu alvo (singleplex), o que eu recomendo ou junto com seu alvo (multiplex), o que não valeria muito a penas se vc estiver fazendo pesquisa com poucas amostras
ja quero o outro vídeo =)
Video excelente
O senhor é fantástico! Obrigado!
Senhor???? Hahahahah. To velho mesmo. Respondi sua pergunta no direct do insta. Ouve lá. Abraços
Excepcional
Aulao
#SYBR biscatão 🤣🤣🤣 Obrigada pela aula!!!
Olá, você falou que a sonda se liga antes dos primers. Mas na PCR one step onde a transcriptase reversa precisa dos primers para poder fazer a síntese de cDNA complementar isso acontece simultâneamente? Ou mesmo assim a sonda se liga antes também? Poderia explicar? Obrigada...
Como que eu normalizo dados de sondas específicas de um microRNA? por exemplo: eu preciso normalizar com U6, certo? Como fazer isso? Eu preciso comprar uma sonda pra U6 tb? Ou eu uso a sonda TaqMan pra o microRNA de interesse e uso outra coisapra o U6???
Se vc já descobriu que o U6 será um bom normalizador (para isso vc deve testar, pois não há gene de referência universal), você vai precisar de um ensaio (dois primers e uma sonda) específico para o U6. Esse ensaio você pode correr separado do seu alvo (singleplex), o que eu recomendo ou junto com seu alvo (multiplex), o que não valeria muito a penas se vc estiver fazendo pesquisa com poucas amostras